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全氟化碳联合肺表面活性物质雾化吸入对兔整肺灌洗急性呼吸窘迫综合征的作用

时间:2018-06-13 18:16来源:硕士论文作者:lgg 点击:
本文是一篇医学硕士论文,医学专业硕士是为培养医学职业高层次专门人才而设立的专业硕士学位,一般要求学员具有一定得职业背景和一定年限的工作经历(工作经历年限要求多为5年)。
本文是一篇医学硕士论文,医学专业硕士是为培养医学职业高层次专门人才而设立的专业硕士学位,一般要求学员具有一定得职业背景和一定年限的工作经历(工作经历年限要求多为5年)。(以上内容来自百度百科)今天为大家推荐一篇医学硕士论文,供大家参考。
 
前 言
 
急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)是各种非心源性致病因素引起的急性低氧性呼吸功能不全,其发展至严重阶段可导致危及生命的低氧血症和继发器官衰竭,目前病死率仍高达 30%-50%[2]。2012 年提出的 ARDS 柏林定义,对 ARDS的诊断标准进行了新的定义[3],去除了 ALI 的诊断, 并对其严重程度进行了细化分级,提高了临床的可操作性。失控的肺部炎症反应、肺泡毛细血管屏障的破坏及肺表面活性物质的功能异常在该疾病的发生和发展中有着重要影响[4]。脂多糖(lipopolysaccharide ,LPS)等可激活体内的补体系统,引发一系列炎症反应,肿瘤坏死因子-α、白介素等可以对毛细血管内皮细胞造成损伤,破坏血管壁的通透性。各种细胞碎片等亦可直接损害血管壁,引起漏出性肺水肿[5,6]。多形核白细胞(polymorphonuclear leukocytes,PMN)在 ARDS 患者肺水肿的进展中担任着重要角色。由于内毒素等各种肺内外因素的作用,PMNs 在肺毛细血管内大量聚集,并从肺泡上皮转移至肺泡腔。肺泡巨噬细胞(alveolarmacrophages, AMs)除作为吞噬细胞和免疫反应的抗原递呈细胞外,也是炎症反应的重要效应细胞,参与 ARDS的发病过程,经刺激而激活的 AMS 释放白介素-1β、肿瘤坏死因子-α 促进 PMNs 向炎症部位迁移,经过滚动、集聚等一系列运动后粘附在活化内皮细胞的表面,最终从血管内皮中渗出。同时各种黏附分子参与了这一过程。白细胞的滚动需要活化的内皮细胞上选择素的介导,随后 EC 表面的细胞间粘附分子-1 表达上调,结合白细胞膜上的同源整合素受体来介导白细胞的黏附过程[7]。具有保护性作用的 P-选择素和 ICAM-1 抗体在各种动物模型中均可减少肺的损伤程度,证实了这些粘附分子在中性粒细胞迁移到肺炎症部位过程中的重要性[8]。
肺水肿、炎症反应、肺泡血流灌注减少等因素都可使肺表面活性物质数量下降并被消除其原本的活性,最终造成肺顺应性降低、肺泡塌陷和肺组织内气 / 血比例的异常。肺顺应性主要反映了肺组织的弹性特点。ARDS 病人由于肺间质和肺泡水肿、充血导致了肺表面活性物质的减少,引起肺表面张力增加、肺容量及功能余气量(functional residual capacity,FRC)明显降低,进而导致肺顺应性明显降低。肺损伤动物模型在研究 ARDS 复杂病理机制和新治疗措施的探索中发挥了重要作用。40 余年来研究人员已经建立了多种动物模型来模拟人类 ARDS 的病理生理特点。造模方法差异较大,其中包括静脉注射油酸、细菌、内毒素,盲肠结扎穿孔致脓毒症、盐酸吸入所导致的 ARDS 模型,大潮气量和高吸气峰压(呼吸机所致肺损伤),烟雾、烧伤或肺缺血再灌注模型等。静脉注射油酸所导致的 ARDS 中,栓子进入肺血管内,堵塞并致使血管内皮细胞及肺泡上皮细胞出现损伤及炎症,最终导致 ARDS 的产生。静脉注射油酸造模方法简单,容易重复实验,但是仅能模仿脂肪栓塞的发病机制。盐酸吸入致 ARDS 模型使肺部直接受损,该方法造模速度较快,但仅被用于模拟临床中误吸所造成的肺损伤,且胃内容物成分较复杂,与盐酸不能等同。经静脉或直接经右心房以一定速率注入脂多糖致 ARDS 为间接导致肺损伤的造模方法,达到 ARDS 诊断标准所需时间较长,容易出现严重血流动力学变化,实验动物死亡率较高,对于实验兔、犬等较大的实验动物来讲,所需脂多糖剂量大,造模时间长,成本较高。盲肠结扎穿孔引起脓毒症致 ARDS 模型能够引起广泛的炎症反应,适用于模拟腹腔感染所造成的ARDS,与临床联系较紧密,但造模操作步骤较复杂,重复性较差[9]。通过反复肺灌洗导致 ARDS 的模型,是由 Lachmann 等人最先创立的,是较早使用的 ARDS 模型之一,实验操作方法较统一,该模型诱导肺损伤的时间较短,肺损伤、气体交换功能损害及肺血管阻力变化程度的实验重复性较好,有助于确保实验样本之间的可比性,减少所需的动物数量。
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材料与方法
 
一、实验材料
(一)实验动物
健康成年新西兰家兔共 32 只(购于上海第二军医大学实验动物中心,普通级,许可证号: SCXK 沪 2012 -0007),雌雄不限,体重 2.0-2.5kg,随机分为假手术组(8 只)、加氧用药组(8 只)、模型组(8 只)、不加氧用药组(8只)。
........
 
二、实验方法
 
(一) 药品制备
使用 DPPC 为载体包覆 PFOB,加入少量蛋黄卵磷脂、抗氧化剂(维生素 E)、表面活性剂(甘油、四丁酚醛),制备 PFOB/DPPC 乳剂,1ml 乳剂含 PFOB 50μL、DPPC30mg,纳米乳剂的水合粒径为 40nm 左右,表面张力 38.703 mN/m。(由上海纳米科技公司制备)
 
(二)实验动物准备及实验分组
32 只新西兰兔实验前不禁水,给予禁食 12h,电子秤称重后使用固定器固定动,左耳剃毛、消毒后给予 3%戊巴比妥钠 1ml/kg 经耳缘静脉麻醉, 仰卧位固定四肢和头部,剃毛并消毒后,在颈部正中纵向切口,行气管切开,置入“Y”型气管插管,在实验兔右侧腹股沟区域切开并分离右侧股动静脉,行右股动脉及股静脉穿刺置管术,给予 5U/ml 肝素钠抗凝,经右股静脉置管给药及留取静脉血标本。将 32 只实验兔随机分为假手术组(8 只)、加氧用药组(8 只)、模型组(8 只)、不加氧用药组(8 只)。假手术组仅行气管切开及右股动静脉置管。
 
(三) 整肺灌洗致家兔急性呼吸窘迫综合征模型的制备
ARDS 动物模型的制备参照 Lachmann 等人的方法。在行气管切开置管、右股动脉及股静脉穿刺置管操作结束后 30 min,将实验动物置于头高脚低位,按 10ml/kg经气管导管注 37℃生理盐水入肺内, 滴入时均匀变动兔体位使之分布均匀,保持20s 后抽出,每隔 5min 1 次,每只兔重复灌洗 3 次。每次灌洗前后给予吸纯氧 2min, 最后一次灌洗完成后 30min 测血气,将氧合指数 PaO2/FiO2≤300mmHg 并维持 30min以上作为 ARDS 模型制备成功的标准。两用药组模型制备同模型组。实验过程中每小时静脉输注生理盐水 4 ml/kg 补充生理需要量.
..........
 
结 果...... 17
一、呼吸频率、氧合指数、动态肺顺应性...... 17
二、PFOB/DPPC 乳剂对肺系数、肺透明指数的影响 .............20
三、四组实验动物血清中 TNF-α、IL-1β 水平.............20
四、实验动物肺组织中 TNF-α、IL-1β 及 ICAM-1 的水平......21
五、肺病理改变...........22
 
五、 肺病理改变
 
假手术组肺组织外观呈淡粉色,表面光滑,光镜显示肺组织结构较完整,未见明显炎性细胞浸润;模型组肺组织较假手术组体积明显增大,外观可见明显肺水肿、充血,光镜下可见肺泡上皮损伤较明显,肺泡萎陷、肺水肿、局灶性肺不张、出血、肺间质、肺泡腔有大量炎性细胞浸润,病理评分较假手术组显著增高(P<0.05); 两用药组外观肺水肿、充血程度较模型组明显减轻,光镜下肺水肿、出血、肺不张及炎症细胞浸润程度较模型组减轻,病理评分均低于模型组,高于假手术组(P<0.05),两用药组间未见显著性差异(P>0.05),见图 5-7。
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结 论
 
1、本实验表明 PFOB/DPPC 乳剂可迅速改善整肺灌洗致家兔 ARDS 模型的氧合,体现了其快速供氧效应,操作简便,而且对肺部气体交换功能的改善作用可维持较长时间。
2、PFOB/DPPC 乳剂的雾化吸入可显著减轻整肺灌洗致家兔 ARDS 模型肺水肿及其他病理损伤,其主要原因可能是 DPPC 与 PFOB 对肺部气体交换功能、肺顺应性的共同作用以及 PFC 对于炎症的抑制。
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参考文献(略)
(责任编辑:gufeng)
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